1.一般来说,较低的退火温度可以360问答提高pcr反应的敏感性但特异性较差;而较高的退火温度则可以提猜含高pcr的特异性但判皮却降析脸宣特岩低了扩增效率。通常引物与模板的退火温度在45-5哥缺汽在型5度。
2.优化退火温度最好的方法是设置一系列对照反应亮分之优,即通过在低于计算出的短负为引物Tm值2-10度的温度范围内,进行退火穗冲笑的一系列平行反应来确定最佳退火温度。也可以通过tou率呼chdownpcr来设定退火温度,得到最佳退火温度。
1.一般来说,较低的退火温度可以360问答提高pcr反应的敏感性但特异性较差;而较高的退火温度则可以提猜含高pcr的特异性但判皮却降析脸宣特岩低了扩增效率。通常引物与模板的退火温度在45-5哥缺汽在型5度。
2.优化退火温度最好的方法是设置一系列对照反应亮分之优,即通过在低于计算出的短负为引物Tm值2-10度的温度范围内,进行退火穗冲笑的一系列平行反应来确定最佳退火温度。也可以通过tou率呼chdownpcr来设定退火温度,得到最佳退火温度。
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