fitc荧光标记原理如下:
FI含矿六建临四将企顾TC异硫氰酸荧光素是一种常用的标记抗体的方法。FITC一般升为黄色。棕色或棕色粉末或结晶,在低温下可保存判睁数年。在碱性条件下,FITC的碳酰胺键可与抗体蛋白上的赖氨酸氨基结合,形成FITC-蛋还坏分肉肥贵材棉亮条白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。
抗体分子可标记15~20个FITC分子。标记的抗体仍能保持与相应抗原结合的能力,在荧光源紫外线或蓝紫光的刺激下产生黄绿色荧光,通过荧光显微镜观察陆钢或使用流细胞仪进行分析,从而定性、定位或定量抗原。
FITC标记抗体方法
F完八阿重快包备者措ITC抗体标记主要包括沿Marshall直接标记法、Chadwick间接标记法、改进标记法和透析法。
FITC抗体标记注意事项
1、温掘逗岁度.时间.pH.荧光素和蛋白质量态意片马集叶叶停于等都是影响标指模记效率的因素,需要控制。
2、荧光素及其异必那毫厚标记抗体的操作过程应注意避光,搅拌速度应龙雷进冷判清适当避免产生气泡。
3、注意正确操作,使柱体均匀.柱面平整,无气泡.裂缝。
4、上样和洗脱应为前切和后切。前切指柱顶缓冲液与凝胶平面相切随尼时加样品,后切指样品与凝胶平训坐注月异烧洋面相切时加洗脱缓冲液。